Analisis Kadar Protein (Metode Kjeldahl)

 

PETUNJUK PRAKTIKUM ANALISIS KADAR PROTEIN

(Metode Kjeldahl, AOAC 2001)

Tujuan: Mampu mengaplikasikan metode Kjeldahl untuk menetapkan kandungan protein dalam bahan pangan.

Alat:

·         Spatula

·         Mortar dan alu

·         Labu kjeldahl

·         Kaca arloji

·         Kompor listrik

·         Rangkaian alat destilasi (Heating mantle, kondensor, pompa, selang, ember)

 

 ·         Neraca analitik

·         Gelas beaker

·         Gelas ukur

·         Pipet tetes

·         Lemari asam

·         Erlenmeyer

·         Corong

·         Buret

Bahan:

·         Sampel

·         K2SO4

·         CuSO4

·         H3BO3

·         NaOH

·         H2SO4

 ·         HCl

·         Akuades

·         Indikator BCG-MR

·         Es batu

·         Batu didih

 

Prosedur Kerja:

Analisis Kadar Protein Metode Kjeldahl (AOAC, 2001)

  1. Penimbangan sampel yang telah dihaluskan sebanyak 1 g.
  2. Pengisian sampel ke dalam labu Kjeldahl.
  3. Penimbangan 7 g K2SO4 dan 0,8 g CuSO4
  4. Penambahan 7 g K2SO4 dan 0,8 g CuSO4 ke dalam labu Kjeldahl yang berisi sampel.
  5. Penambahan larutan H2SO4 sebanyak 12 ml, dilakukan di dalam lemari asam.
  6. Proses destruksi dilakukan di dalam ruang asam dengan memanaskan sampel yang ada pada labu Kjeldahl menggunakan kompor listrik hingga berwana hijau tosca.
  7. Pendinginan labu Kjeldahl dengan cara didiamkan selama 20 menit.
  8. Penambahan 25 ml akuades ke dalam labu Kjeldahl yang berisi sampel.
  9. Penambahan 50 ml NaOH 40% dan beberapa butir batu didih ke dalam labu Kjeldahl yang berisi sampel.
  10. Penambahan 30 ml H3BO3 ke dalam erlenmeyer dengan ditambahkan indikator BCG-MR 3 tetes untuk menangkap destilat dari hasil destilasi.
  11. Perangkaian alat destilasi.
  12. Destilat yang diperoleh dari hasil destilasi dititrasi dengan menggunakan larutan standar HCl 0,1 N hingga warna larutan berubah menjadi merah muda seulas.
  13. Lakukan prosedur yang sama untuk menghitung % N blanko (sampel diganti dengan akuades).

 

Perhitungan:

% Protein kasar = % N x faktor konversi protein

 

Keterangan:

Tabel 1. Faktor Perkalian N Beberapa Bahan

Macam Bahan Faktor Perkalian
Bir, sirup, biji-bijian, ragi 6,25
Buah-buahan, teh, anggur, malt 6,25
Makanan ternak 6,25
Beras 5,95
Roti, gandum, makaroni, mie 5,70
Kacang tanah 5,46
Kedelai 5,75
Kenari 5,18
Susu 6,38
Gelatin 5,55

Sumber: Sudarmadji, dkk., 2007

Catatan:

  • Prosedur penggunaan lemari asam:
  1. Pastikan aliran listrik tersambung pada lemari asam.
  2. Buka kaca penutup lemari asam hingga setengah terbuka.
  3. Nyalakan stop kontak untuk menyalakan blower.
  4. Lemari asam siap digunakan.
  • Perangkaian alat destilasi:

Pastikan rangakain destilasi terpasang dengan baik sesuai dengan gambar di atas.

Untuk mengunduh file Petujuk Praktikum Analisis Kadar Protein Metode Kjeldahl, klik di sini.

Email, RSS Follow